做荧光定量pcr前两个需要比较的样品RNA反转必须按照等量进行反转吗

荧光定量PCR和实时荧光定量PCR是一样的啊

完全可以,PCR长度从50bp到数百都可以,不止局限于150-300个碱基对.楼上说的有道理,但是有一点要注意,最好计算一下扩增片段的Tm值,这样做溶解曲线的时候,光有一个峰还不够,而且得到的TM和你

RT可能含义：reversetranscribe是逆转录,那么相应pcr应该是由rna凡转录cdna过程realtime实时定量那么就是荧光定量pcr了

建议你还是选择CDS区不一样的地方设计引物吧,这样可以避免交叉污染引起的非特异扩增,扩增的序列长度不一定要一样,每个引物你最好设计两三对,然后做一个相对定量看看不同引物的扩增效率,选择比较好的两对引物

荧光定量PCR和半定量RT-PCR都可以用来检测基因的表达量的,但二者检测的东西多少有些不同.荧光定量PCR是在PCR反应体系中加入可以和双链DNA特异性结合的荧光染料（sybrgreen）或者和目的

根据你的问题简洁回答一下:第一.应该一起看.从你1.7乘以10的4次方copies/ml的数据可以证明你是乙肝小三阳患者.一般来说,小三阳的病人体内的病毒量较小,传染性也不强.乙肝大、小三阳只是乙肝病

博凌科为-为你如果lz确实已经确定该基因SNP位点以及突变型,你可以选择荧光定量PCR进行检测,检测方法是：1、探针设计在突变位置,有几个突变点设计几个（不同突变型需要不同的荧光标记：例如,野生型探针

说一下自己做实验时候用到的东西,血液提取mRNA还是采用试剂盒来提取,手工法极不推荐,但是试剂盒还是蛮贵的,可以问一下天根公司,价格还算可意,效果也不错.逆转录过程可以用Fermentas一款逆转录试

一般的RT-PCR引物是不能用来做是实时荧光定量的的引物的,但是你可以设计出兼顾二者的引物,除了要注意一般引物设计的原则外,愚见认为还要注意下两个问题：

我们课题组和威斯腾生物合作比较多,有的实验室条件有限做不了的实验,我们都是联系他们帮我做,他们有自己的实验室,还可以全程参与,这样也对实验结果放心些.

你最终写文章要用的数据必须要做重复.但如果只是初期筛引物或者你只是想自己做个预实验看看情况,你做1孔或两孔也不是不行.

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对这个是必须的.再问：那每次做的标准曲线的差异怎么去评价呢？差异在什么范围内可以呢？谢谢再答：必须的每次都做做标准！

在逆转录之前必须要检测总RNA浓度：1、为下一步逆转录加入总RNA的量提供依据.2、通过260/280比值判定提取的总RNA纯度.

热启动是为了提高特异性.需要热启动的试剂盒,Taq酶上加了一个封闭抗体,在不加热到设定的温度并维持一段时间前,抗体一直处于结合状态.这样,在没有到达优化温度时,taq没不发挥作用.就减少了非特异扩增的

首先是获取菌体,再提总RNA,不用再分离mRNA,直接做反转录RT-PCR,得到cDNA后直接进行荧光定量PCR.得到的得到cDNA可以保存的时间比较长.这样荧光定量PCR就可以集中一起做.

阅微基因的荧光定量PCR我们医院去做过,效果非常不错.

试剂药品无非就是酶BUFFER可以认为基本无毒根据不同方法进行荧光定量PCR你可能会用到SYBRGreenI或者带有荧光基团的探针探针本身是无毒的(DNA),荧光基团只要不进入你的身体里问题也不大(做

定量检测包括总RNA提取和纯化、（可能还需要做mRNA提取和纯化）、RT、定量PCR还需要反转录用的引物、定量PCR用的一对引物、荧光信号源（荧光染料或荧光标记的探针,看你用什么策略来做定量PCR）报

荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品的初始模版.