电泳时,为什么条带不均匀
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/17 15:47:09
核糖体RNA的含量最高,因此这三条带最明显,可是其实不只是这三条,可能你们实验条件有限,只看到3条了,我实验中有时候能看到很多条
既然连上去了怎么可能切不掉.你确定连上去了么.几个条带不重要关键是有没有那个片段大小的条带再问:是可能没连上。可是现在的问题是就算是空质粒也没有酶切开~~~酶切是不是就有问题~~再答:质粒切完跑胶的时
有没有可能,有环状超螺旋DNA、开环DNA与变性的线型DNA三种空间构想,导致跑出3条带
中间的是RNA
可以照胶的时候去调节亮度,对比和γ射线,然后会清楚一些.同时,你优化下PCR扩增条件之类的,提高扩增效率.希望对你有帮助.望采纳.再问:感谢回答,我会试试调节亮度。请问,这跟电泳时使用的染色液有关系吗
问题很多啊.或者是你的PCR仪需要进行荧光校准(如果其他探针也没有信号的话),已经不能收集荧光信号了.或者是你的探针本身就有问题,合成的不好,信号很弱甚至没有信号.或者是你的探针存放时间太长,存放条件
不排除是预染Marker质量又问题再问:marker没有问题,实验室其他人做实验就没有问题。因为我是独立出来的,所以实验过程和仪器与他们不是很相同再答:那建议你在适当延长一下转膜的时间吧,三、四个小时
一片亮,一般是样品处理或者配胶的时候不注意,混入了一些内切酶,或是电泳温度高,导致核酸降解,尤其是跑RNA电泳,很容易这样.建议用新胶,新TBC(TAC)重新跑一次,样品用醋酸铵重新纯化,电泳槽用缓冲
用这个方法复溶蛋白时很难完全溶解掉,样品处理很是个问题,应该是蛋白浓度不高.我做过类似的也是用这个方法,电泳出条带很浅甚至没有,很郁闷.再问:那你后来是怎么解决这个问题的呢?是bufferB溶解的时候
可能有几个原因:一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是
因为这两种RNA的相对含量啊亲.那两条带一条在3.8kb,一条在2kb,都是rRNA的一部分,本来的相对含量大概就是1:2.另外,要达到这两条带1:2的比值比较难,只要最下面弥散的带不多质量就还可以,
首先,看你提取什么RNA,如果你提取血液里面的小RNA那没有条带是正常的,因为小RNA没有结合EB的结构,所以电泳你看不到什么东西.其次,如果你提取细胞总RNA的话,就可能如一楼的朋友回答的那样,但不
主带显著的情况下,很可能是引物聚合体.如果没有出现显著的你想要的主带,则是非特异扩增产物.第一种情况没事不用理会,第二种情况需要筛查模版中与引物的非特异性互补区,重新设计引物,或者升高退火温度试试.
用迁移率算迁移率=蛋白质分子的移动距离:前沿分子的移动距离迁移率(m),蛋白质分子量(M)lg(M)=-bm+k其中b和k为常数也就是说迁移率(m)与蛋白质分子量(M)的对数成反比实验中用已知蛋白质分
出现非特异性扩增带PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带.非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2
我觉得主要是胶和电泳缓冲液的问题,Tris8.86.8浓度,pH是否正确.SDS的纯度可能也有关系.丙烯酰胺的浓度,交联度合适不合适.做胶的时候各种溶液是否加的正确,胶的浓度是否合适,电泳缓冲液的浓度
RNA在提取过程中和保存期间非常容易被RNA酶降解,提取过程得非常小心,保存期间也得加RNA酶抑制剂,不知道紫外分光光度计检测时含量和纯度如何,及时被降解,也应该有拖尾才对,可能是浓度太低,建议加大上
你提出了两种构型的质粒所以有两条带,另外你的质粒PUCmT应该含有两个Ecor1酶切位点所以虽然有不同构型的智力被切割但产生的片段还是两条,并且大小形同,因为此时片段已经呈现线性.
开始我以为是退火温度问题,但是你说做了两次,第一次没有条带,第二次有一条没有,这说明你加样有问题,还有你为什么要同一个cDNA要做六个PCR呢?还是lz说的不清楚?同样的条件同样的样品没理由会六条中只
后加电泳液的话液体溢过胶体时的流动容易把蛋白质样本冲出其所在的井.而且这样做容易在胶体四周留下液体无法进入的空隙,可能影响电泳效果.应该是这样