酶切载体电泳降解
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/19 20:09:57
基因工程的载体可以用DNA病毒做载体目的基因是基因,只能是dna,不可能是rna能够逆转录的病毒是RNA病毒,不能做基因工程载体
既然连上去了怎么可能切不掉.你确定连上去了么.几个条带不重要关键是有没有那个片段大小的条带再问:是可能没连上。可是现在的问题是就算是空质粒也没有酶切开~~~酶切是不是就有问题~~再答:质粒切完跑胶的时
PCR扩增目的基因时,用限制酶的切取目的基因就可.与载体没有关系.载体是在构建表达载体时才用.限制酶切获取目的基因,一般都用同种限制酶,从外源基因上切两刀即可获取目的基因,多位黏性末端.PCR扩充目的
因为内切酶的酶活性单位定义是在50ul反应体系中,最适温度反应1小时能够讲1ugDNA完全酶切的酶量.所以,一般在酶切体系里,DNA的量是可以加到非常大的.因为考虑到后期的纯化后DNA的损失问题,所以
1,能看到你的目的基因是否P出来了,2,得到的目的基因是否单一检测后如果是你的目的条带,而且很唯一,就可以做克隆了
载体不是酶,是一段DNA序列片段,里面含有各种启动子,酶切位点,抗性基因等,便于DNA的重组
降解是指把细胞壁用酶溶解掉.细胞壁(cellwall)存在于植物、真菌和细菌细胞外围的一层厚壁,主要成分为多糖类物质.细胞壁与维持细胞的一定形态、增强细胞的机械强度有关,并且还与细胞的生理活动有关.植
脂肪在脂肪酶催化下降解为甘油和脂肪酸
蔗糖酶、麦芽糖酶Ⅲ、麦芽糖酶Ⅳ等(蔗糖酶sucrase将蔗糖水解成D-果糖和D-葡萄糖的β-D-果糖苷酶的一种,又称为转化酶(invertase)或蔗糖酶(saccharase)EC3.2.1.26.
首先得判断蛋白条带是否正确,因为32a表达过程中,会在目标蛋白上加上部分自己序列,所以电泳图谱中你所要表达的蛋白,应该比你自己预期的大20-30kDa.其次,原核表达,只是表达了酶蛋白序列,但蛋白序列
一片亮,一般是样品处理或者配胶的时候不注意,混入了一些内切酶,或是电泳温度高,导致核酸降解,尤其是跑RNA电泳,很容易这样.建议用新胶,新TBC(TAC)重新跑一次,样品用醋酸铵重新纯化,电泳槽用缓冲
因为这两种RNA的相对含量啊亲.那两条带一条在3.8kb,一条在2kb,都是rRNA的一部分,本来的相对含量大概就是1:2.另外,要达到这两条带1:2的比值比较难,只要最下面弥散的带不多质量就还可以,
电泳结果只能看出序列碱基数的大概,你要分析哪方面的啊再问:这是我们大三的分子实验,结果分析那里我卡住了我也不知道能从哪些方面分析?再答:电泳的目的就是看PCR产物以及其他一些试验品的碱基数,通过和ma
彻底无语--!同学,得根据你的载体序列目的基因序列确定,一般都用软件处理,例如geneconstructionkit等.当然你手绘也可以--!你想,通过这两个酶切位点把一个1.5kb的目的基因连到4k
酶切完全的话,就是一条4kb左右的带,一条1.5kb的带.不完全的话,就多一条5.5kb的带
还有其他的方法,比如分子杂交,根据你检测的是DNA还是RNA可选用southern或Northern杂交.还有转基因,瞬时表达,荧光定量PCR等等.主要是看你检测基因的目的及所要达到的要求是什么.如果
10种食物赶走胆固醇苹果:因富含果胶、纤维素和维生素C,有非常好的降脂作用.如果每天吃两个苹果,坚持一个月,大多数人血液中的低密度脂蛋白胆固醇(对心血管有害)会降低,对心血管有益的高密度脂蛋白胆固醇水
你提出了两种构型的质粒所以有两条带,另外你的质粒PUCmT应该含有两个Ecor1酶切位点所以虽然有不同构型的智力被切割但产生的片段还是两条,并且大小形同,因为此时片段已经呈现线性.
如果你选的两种酶可以同时进行切(buffer,反应温度都相同),就同时进行双酶切,然后电泳检测有没有得到你所切下来的目的片段的大小.环状和线状电泳速度不一样,一般环状的跑的快点.
5s是不是很亮的一片拖尾,如果是的话,就是降解了.如果你是做RT,不妨接着试一次,记得设好阴性和阳性对照;如果做Northern,那就重提吧.鸡肝RNAase多,提取时小心些.