百度作业网rna反转录为cdna中DTT的作用
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/07/19 11:48:59
先从细胞提取总RNA,然后根据大多数真核mRNA含有多聚腺嘌呤（polyadenylicacid,polyA）尾的特点,用寡聚dT纤维素柱将mRNA分离出,以mRNA为模板,在多聚A尾上结合12－18
理论应该用CDNA进行因为设计,但要保证你提取的mRNA的质量,尽量减少降解.可以在原序列基础上先写出互补序列再进行引物设计.
反转录是指从RNA转录为DNA,但是分两步,因为rna是单链的,所以第一步得到是是单链DNA,而第二步则是以上步合成的单链DNA为模板,合成双链DNA.前一步就是一链反转录,而第二步叫做cdna双链的
反转录失败或者RNA质量不好再问：有没有可能是引物的设计不好？（引物二聚体的范围是在100bp左右）如果是cDNA反转录不好，该如何检测呢？谢谢再答：有可能是引物的问题；在P目的基因的时候，建议你同时
影响不大,不用考虑.TRIZOL等常用方法提出来的总RNA都有一些蛋白质污染.
DNA复制是以自身的两条链为模板,利用酶,游离的脱氧核苷酸,线粒体提供的能量,以碱基互补配对为原则,即G-C,A-T,进行半保留复制,复制出DNA.RNA制是以自身的一条链为模板,利用酶,游离的核糖核
第一次70度水浴5min为让RNA二级结构打开,便于引物结合.第一次冰浴1min为了退火,让引物能够结合RNA.37度水域是让cDNA聚合.第二次70℃水浴是再变性,让引物脱离模板RNA和cDNA第一
有些RNA病毒不反转录有些ssRNA病毒,一旦病毒颗粒中的RNA进入寄主细胞,就直接作为mRNA,翻译出所编码的蛋白质,其中包括衣壳蛋白和病毒的RNA聚合酶.然后在病毒RNA聚合酶的作用下复制病毒RN
由于基因的选择性表达,人的肝细胞和神经细胞中的mRNA不同',因此反转录的cdna也不同
楼主你去百度查一下高通量测序找家测序公司问问他们的测序客服就好了百度知道这里的回答应该不专业您找测序公司问这样得到的是专业而实用的解答
可以大概估算.考虑一下几个因素：1.大多数RNA是28s,16s,5s等rRNA,mRNA其实占少数.他们都会反转录为cDNA..你若估计mRNA反转为cDNA的量较难.2、反转录和你添加的引物量有关
因为DNA中含有很多片段是无效的,而mRNA中的所有基因都是有效的,所以通过mRNA最终合成的cDNA中的基因全都是有效的
不,需要两条,因为随着你PCR的进行,另一条互补链会被引物扩增出来,因此你需要两条引物都加进去.再问：那么我引物设计的时候，是不是以mRNA为模版与以CDNA为模版设计的引物都可以？再答：都可以，别忘
小麦总RNA的提取实验目的从黄化小麦苗中提取总RNA,可以为cDNA文库的构建做好准备.我们重点是要保证RNA的完整性、产率、防止修饰和纯度,尤其是完整性、防止修饰和纯度.RNA是单链,2’OH是它的
在PCR仪中,95度变性,72度延伸,Tm温度退火,来回30-35个循环,最后4度,就能得到反转录的cDNA.
是的,是单链.想获得双链,请看如下：为具有与某RNA链呈互补的碱基序列的单链DNA即complementaryDNA之缩写,或此DNA链与具有与之互补的碱基序列的DNA链所形成的DNA双链.与RNA链
逆转录生成单链DNA和MRNA的杂交链后来单链DNA在与游离的核苷酸合成双链
操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水65C反应10min,冰上放置5min后：这一步是让RNA变性,把RNA的二级结构打开；再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应
DTT上的巯基可以保护逆转录所用酶的二硫键,增加蛋白稳定性.还是加吧~