rna提取电泳条带和长度的关系
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/07/14 11:05:10
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这个要看条带的位置了,如果是在加样孔附近的话就是蛋白质污染了,你最好把电泳图片附上来,我再给你看看
核糖体RNA的含量最高,因此这三条带最明显,可是其实不只是这三条,可能你们实验条件有限,只看到3条了,我实验中有时候能看到很多条
有没有可能,有环状超螺旋DNA、开环DNA与变性的线型DNA三种空间构想,导致跑出3条带
中间的是RNA
蛋白污染会在电泳孔有亮带,跑不出来.RNA污染会在最下边,一团弥散的亮带,但DNA如果降解的话也有这种现象.
条带显示的亮度是你一定体积上样量的DNA总量,而你吸光度测定是浓度,两个比较不能说明什么,电泳只是体现有没有和相对其他条带DNA的大小和量
生物体内一般含有核糖体RNA(rRNA)、信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)三种主要的RNA,其中rRNA含量最多,提取组织总RNA所得最多的就是rRNA.真核生物中含有5S、5.8S、1
首先越靠近点样孔,分子量越大,如果你加了marker,可以根据厂家给的那张maker的图推测样品的大小,一般来说,在同一水平位置的分子量大致相同.没什么特别高深的技术含量分子量与亮度和长度无关的,亮度
应该是DNA污染~你用DNase处理下RNA提取物再用EDTA终止DNase活性~在跑下看看~一般都是DNA污染~才会在那个位置~
因为这两种RNA的相对含量啊亲.那两条带一条在3.8kb,一条在2kb,都是rRNA的一部分,本来的相对含量大概就是1:2.另外,要达到这两条带1:2的比值比较难,只要最下面弥散的带不多质量就还可以,
首先,看你提取什么RNA,如果你提取血液里面的小RNA那没有条带是正常的,因为小RNA没有结合EB的结构,所以电泳你看不到什么东西.其次,如果你提取细胞总RNA的话,就可能如一楼的朋友回答的那样,但不
电压和电泳时间调整过没有?有没有都跑出去了?你是用什么跑的?以前做过没有?调整一下浓度看看(琼脂糖或者丙烯酰胺的浓度),个人感觉胶没做好的可能比较大.
核酸电泳时使用的是EB染料吗?如果提取的样品中还有较多的RNA,RNA分子量较小,电泳时跑在前面,会结合较多的EB,影响DNA的观察,建议RNA酶37度消化30分钟.再问:用的goldview。再答:
PRC跑不出来先考虑是不是模板的问题,是不是DNA没有抽出来,可以把抽出来的东西跑个胶看一看.如果抽出来了,但是PCR没跑出来,就把模板浓度降低一下;如果DNA没跑出来,就要从抽提步骤上找问题.你们用
这要具体分析.一种可能是你的PCR产物是非特异性片段,所以长度不一,这可以通过和你预期PCR产物的长度进行比较来判断.另一种可能是该基因在不同情况下有不同的剪接模式(alternativesplici
marker能看到吗?marker很清楚,电泳就没问题.说明没有DNA.可能提取失败,沉淀也许是盐.测测浓度吧,应该很低.看看提取程序是不是有问题.
因为琼脂糖凝胶只能分辨20kb以下的线性DNA,超过20kb的线性DNA都只会和20kb的线性DNA拥有一样的迁移速率.而基因组DNA一般都远远大于这个数,所以一般情况下所有的DNA都只会聚集于一条带
RNA在提取过程中和保存期间非常容易被RNA酶降解,提取过程得非常小心,保存期间也得加RNA酶抑制剂,不知道紫外分光光度计检测时含量和纯度如何,及时被降解,也应该有拖尾才对,可能是浓度太低,建议加大上
5s是不是很亮的一片拖尾,如果是的话,就是降解了.如果你是做RT,不妨接着试一次,记得设好阴性和阳性对照;如果做Northern,那就重提吧.鸡肝RNAase多,提取时小心些.
很正常可能是DNA