高at的模板怎么做PCR

一般未知的序列旁边都有已知的一段吧,就是你说的“修饰片段”?PCR这种flankingsequence可以有很多方法,比如TAIL-PCR,用ADprimer（简并引物）和特异性引物就可以得到目标片段

这是基础知识问题,请抬头,看本页面的导航栏,找到专题,点击进去有个引物设计专题,把上面的资料都研究透彻了,如果还不会再问.同时你也可以去生物秀论坛pcr实验版块看看,相关文章很多.………………

现在最简便的方法是买全血DNA抽提试剂盒,技术已经相当成熟,里面一般都有使用说明.国产的就很好用了,而且便宜.

PCR原理:DNA的热变性,DNA复制.条件:TaqDNA酶(一种耐热DNA聚合酶)由脱氧核苷酸合成DNA片段都需要酶的催化和ATP供能.模板:DNA的两条链.产物:DNA片段.检验是否转录用DNA分

你的序列AT含量很高,测序结果不好,所以我怀疑是你的片段里有polyA或者是polyT,一般超过7个以上的都会引起后续的测序乱峰,你的乱峰前边如果是一连串的A或者T的话,那就是这个原因,想要测好得靠运

全部打断,加接头,然后引物设计在接头上.

在百度知道里怎么会问这个问题?都有专业的书籍或者文献可供参考的.不同的试剂公司还有荧光定量的培训PPT,你需要的话我可以给你发过去.

用灭菌DEPC水以保证没有RNAse降解你的模板RNA,不要用含有EDTA的buffer,包括TEbuffer.EDTA会络合掉镁离子,从而干扰PCR反应.

可以直接用DNA模板,只要DNA模板质量够好.

以PCR产物为模板,只要引物,体系对,怎么P怎么出.你的模板就是PCR产物,浓度再低也没事,稀释100倍没问题.没什么要注意的

差不多吧,只要把DNA提取出来,照样做PCR

简单呐,主要是设计引物,分为外套引物和内套引物你可以设计单边巢式或者双边巢式的引物,如果内套引物为1和2的话,外套可以设计3和4,或者设计3和1配,或者设计3和2配.打个比方,比如你要扩增的目的基因在

“文件-另存为”,文件类型选择为WPS模板文件

我本人没具体做过信息学,有个师弟以前做过,就我薄弱的了解,我觉得其实你自己想的方法已经是正道了.由于你现在是时间有限,虽然你调高SAM参数有可能漏掉关键基因,但应该会缩小目的基因范围.用GO分析也是个

基因组做模板,最大的麻烦是特异性问题,特异性不好,杂带会比较多.有时引物设计的特异性比较好,常规pcr就基本搞定.建议你的模板量不要太大,在设置pcr条件时,先做5个稍高的退火温度,以扩增出更多的特异

一般来说,RT-PCR的时候很多情况下会不知道模板DNA的序列,可以在Genbank中寻找和你要扩增的物种的亲缘关系较近的物种的同源基因,多找几种,用DNAMAN或其他软件可以比对它们的序列,这样可以

主要看你的CT值大约是多少,如果很大（大于40循环）那么可以判定结果没有问题,如果跟目的基因的CT一致或者为其他CT值那么判断为模板造成的气溶胶污染或者其他外缘DNA造成的污染.另外你阴性对照加的是水

为什么不抽基因组?抽出来的模板你可以用好多次.煮沸法模板有效期短,提取的效率也很低下,干扰PCR的杂质也多.就像你PCR失败一样,不一定是模板中没有DNA,也可能是杂质干扰的结果.如果样本只是一个菌,

一般来说,引物都是成对设计的,包括上游引物和下游引物；除非你设计出来的上游引物与下游引物相同,才可用单引物扩增.否则,若用单引物则只能扩出一条链再问：用单引物扩增出的产物跑电泳，在紫外灯照射下的条带是

引物是用来限制目的序列位置的,左右两端各需要一个引物限制,所以是两条.模板是已经确定含有目的DNA序列的基因、细胞液、溶液等等,只要你确定里边含有目的基因,就可以通过PCR将其大量扩增.