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如何确定特征吸收峰?吸收光扫描显示在280nm处附近有最大吸收峰(蛋白质吸收峰),而我所要的峰应该在465nm处(一种蛋

来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:化学作业 时间:2024/06/30 19:06:02
如何确定特征吸收峰?
吸收光扫描显示在280nm处附近有最大吸收峰(蛋白质吸收峰),而我所要的峰应该在465nm处(一种蛋白和铁结合后的特征峰).请问我测得的453.9nm处存在的一个峰是我要的特征峰吗?是因为溶液中杂质的影响导致峰偏移的吗?另外280nm处那个峰是怎么回事?是不是所有测结合蛋白质的吸收峰曲线的都会出现这样的情况?
如何确定特征吸收峰?吸收光扫描显示在280nm处附近有最大吸收峰(蛋白质吸收峰),而我所要的峰应该在465nm处(一种蛋
蛋白质与金属离子结合前后吸收光谱发生变化是再正常不过了,恰好说明它们之间存在相互作用.
如果你要的峰在465nm,而所测的峰在454nm,有约11nm的差异,这应该反映结合方式或蛋白质种类上有差异,应该属于特征峰.
可以检验结合前吸收峰是不是所研究蛋白质的特征吸收峰,以确定该蛋白质的纯度或种类;
结合以后与特征峰的变化与文献比较,从中分析出是哪个环节引起差异;
不同结果可是好东西,有助你发论文.
再问: 谢谢。不过只是一个大二的自主实验罢了,不可能发论文……样品已经用完,不可能再重新鉴定并分析了。还有一个疑问并没解答,结合后有了特征峰,为什么那个蛋白质峰仍在呢?SDS-PAGE明明显示我所提取的样品液中样品量最大啊,杂蛋白的量并不多啊。那个280nm的峰是怎么回事呢?难道还是样品显示的?PS:只是实验过程中看见有人在用吸收光扫描分析仪,好奇让他帮我的样品也测了下,其实我并不懂该怎么分析。。。。
再答: 蛋白质的特征峰还在且没有发生变化,说明金属离子结合点并不在蛋白质特征峰产生处。 不论是大几的实验,只要较真,还是会有新东西的,就算是初中实验也会有新东西。
再问: 你的意思我明白了 但是“还有一个疑问并没解答,结合后有了特征峰,为什么那个蛋白质峰仍在呢?SDS-PAGE明明显示我所提取的样品液中样品量最大啊,杂蛋白的量并不多啊。那个280nm的峰是怎么回事呢?难道还是样品显示的?”
再答: 我的意思你没有完全明白,我说得应该是清楚的,请看这一句:“蛋白质的特征峰还在且没有发生变化,说明金属离子结合点并不在蛋白质特征峰产生处”!为什么不可以是样品产生的峰呢?还有,若蛋白质过量而金属离子不足,也可以两特征峰(蛋白质特征峰、金属蛋白特征峰)并存啊。
再问: 就是说一个样品可以产生两个峰?一个蛋白质峰 一个特征吸收峰 是这个意思?(金属离子是过量的 而且饱和过程应该没问题)
再答: 一个样品产生三个峰、五个峰也很正常啊,为什么不可以产生两个峰? 在前面也说清楚了,蛋白质特征峰保留的两种可能: 1、金属离子作用点不在蛋白质产生特征峰位置; 2、部分蛋白质并未与金属离子作用(就算金属离子过量,也没有理由所有蛋白质都与金属离子作用上了,化学平衡毕竟有可逆,不过可以用吸收峰强弱作出判断)。