通过16srDNA鉴定细菌的疑惑

来源：学生作业帮编辑：百度作业网作业帮分类：综合作业时间：2024/08/12 10:36:44

通过16srDNA鉴定细菌的疑惑
1、为什么不能把PCR所得溶液直接用来测序,是测序技术的限制么?提供给测序公司的应该是转化阳性的菌液,还是提取出来的质粒?
2、pcr产物跑胶后要胶回收再做载体连接,能否用pcr后溶液回收?
3、其操作流程是这样么?DNA提取---16srdna片段pcr扩增---跑胶检测---
胶回收---T载体连接---质粒转化---阳性克隆菌筛选（白色菌落）--提取质粒?--送去测序

1. PCR所得溶液必须经过纯化后才能进行测序.因为PCR反应中的残留物很多,都会影响测序的结果,可以说是测序技术的限制.目前PCR完后用酒精醋酸钠进行纯化,再上机检测.菌液和质粒都可以进行测序.
2.PCR产物跑胶的目的是找到目的条带,因为在你PCR的过程中也许会产生一些非特异性的扩增,这些是不能拿去做转化的.所以跑玩PCR后要跑胶,找到目的片段再进行切胶回收.溶液回收是不行的.
3.基本流程就是这样的.DNA提取完了以后还是要跑胶检测的,测定DNA提取的效果和浓度.胶回收一定是找到目的片段的胶才能切胶回收,非目的片段的是没有用的.扩增不需要用高保真酶,TAQ酶会在产物末端直接加上A碱基,能直接和T载体连接,方便的很.

细菌如何提取16srDNA（用来做种类鉴定的）细菌现在已经16SrDNA鉴定到了属,其中有几个的比对的同源性100%.其他的我需要鉴定到种怎么办?呵呵 16srDNA 测出的两条序列都要比对吗?详细最好了(整个鉴定流程)!我是新手 S rDNA基因的V3区引物与16SrDNA 基因序列的扩增采用细菌通用引物之间有什么区别呢? 细菌分类鉴定的意义生化鉴定管都能鉴定哪些细菌?需要各个细菌特定的生化鉴定管吗? 初步鉴定分解尿素的细菌常用什么试剂鉴定? 细菌鉴定的方法有哪些啊? 利用16srDNA单向测序后的结果分析--求参考书籍,最好详细系统的讲述 1、单个的细菌个体微小,肉眼难以看到,我们可以通过观察什么来鉴定菌种?鉴定的依据有哪些?2、细菌的生存需要什么样的条件? 细菌鉴定办法有哪些,常见细菌的鉴定办法就可以~ 制作生物的细菌培养液上的疑惑