DNA甲基化重亚硫酸盐处理后pcr扩增U如何转变成了T
来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/22 09:41:11
DNA甲基化重亚硫酸盐处理后pcr扩增U如何转变成了T
甲基化DNA经重亚硫酸盐处理后,未被甲基化的C转变为U,用pcr扩增,碱基U如何转变成了T?我一直没搞清楚,相关文献也只是给出了结论,感激不尽.
甲基化DNA经重亚硫酸盐处理后,未被甲基化的C转变为U,用pcr扩增,碱基U如何转变成了T?我一直没搞清楚,相关文献也只是给出了结论,感激不尽.
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甲基化特异的PCR扩增法是采用重亚硫酸盐处理DNA,未甲基化的胞嘧啶(C)转变为尿嘧啶(U),而甲基化的胞嘧啶(C)不变.采用特异两对的PCR引物,其中每对引物中的一条针对检测位点,其或A,若用3端的最后一个为G的引物从处理过的DNA扩增出特异产物,表明存在甲基化,若用3端的最后一个为A的引物从处理过的DNA扩增出特异产物,表明没有甲基化(因为C变为U).这种方法的优点是避免了酶切不完全可能导致的假阳性问题,敏感性高.
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DNA 70%乙醇洗后干燥的DNA用TE溶解大约需要多长时间才能进行下一步的pcr扩增?
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