SDS-PAGE电泳遇到的问题.
来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:语文作业 时间:2024/08/20 03:35:00
SDS-PAGE电泳遇到的问题.
电泳速度比平常快很多,而且进入分离胶后出现弥散,跑出的条带是斜,条带越跑越宽
这是今天开始跑的情况,很是不正常
![](http://img.wesiedu.com/upload/d/82/d8280f7fde69707b8728696594f6e390.jpg)
电泳速度比平常快很多,而且进入分离胶后出现弥散,跑出的条带是斜,条带越跑越宽
这是今天开始跑的情况,很是不正常
![](http://img.wesiedu.com/upload/d/82/d8280f7fde69707b8728696594f6e390.jpg)
![SDS-PAGE电泳遇到的问题.](/uploads/image/z/18925530-42-0.jpg?t=SDS-PAGE%E7%94%B5%E6%B3%B3%E9%81%87%E5%88%B0%E7%9A%84%E9%97%AE%E9%A2%98.)
3个方面,电泳仪、缓冲液、胶
电泳仪你可以换一台好的试一下,如果跑出来还这样,下一步,如果好了,那么要么你设置出了问题,电压电流什么的,要么仪器坏了..
缓冲液注意PH 以及SDS的量,可以换一瓶试一下,比如别人配的...如果还是有问题下一步,如果好了,那么...话说你可以blame天平~
胶如果配稀了或者没凝好也可能是弥散的...换块胶吧.
最后说一下 条带越跑越宽是必然的,条带最后终归会有部分弥散,就看你需要跑多少大小的蛋白,一般120V恒压65min10%或8%的胶30KDa以上都不会太弥散,如果你确实需要分离小蛋白,请使用glycine-SDS-PAGE,protocol自己上ncbi搜~望实验顺利~
电泳仪你可以换一台好的试一下,如果跑出来还这样,下一步,如果好了,那么要么你设置出了问题,电压电流什么的,要么仪器坏了..
缓冲液注意PH 以及SDS的量,可以换一瓶试一下,比如别人配的...如果还是有问题下一步,如果好了,那么...话说你可以blame天平~
胶如果配稀了或者没凝好也可能是弥散的...换块胶吧.
最后说一下 条带越跑越宽是必然的,条带最后终归会有部分弥散,就看你需要跑多少大小的蛋白,一般120V恒压65min10%或8%的胶30KDa以上都不会太弥散,如果你确实需要分离小蛋白,请使用glycine-SDS-PAGE,protocol自己上ncbi搜~望实验顺利~