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有关标记基因和受体细胞的筛选的问题

来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/16 06:06:34
有关标记基因和受体细胞的筛选的问题
在大肠杆菌的质粒上有抗四环素基因
那么它作为标记基因和目的基因的载体形成重组质粒
由于这个重组质粒与普通大肠杆菌中未重组的质粒一样具有四环素抗性
若再用大肠杆菌作为受体细胞,这个筛选机制不是会失效吗?
我个人认为不能再用大肠杆菌作为受体细胞,可是教科书上的例子就是用的大肠杆菌
有关标记基因和受体细胞的筛选的问题
首先,不是任何大肠杆菌都可以作为受体菌的,感受态细胞就是受体细胞需要选择对抗性标记敏感的菌株,就是说如果准备转化入受体菌的重组质粒用四环素做标记,受体菌本身对四环素是敏感的才行,否则就得更换菌株或者更换筛选标记.
其次,标记基因和目的基因(用你举例的四环素)是体外利用基因工程技术重组到一起的,然后转化入对四环素敏感的受体株才可以进行四环素筛选,能存活的就是阳性,不能得就是质粒没转入
当然了,看是否成功制备除了抗性标记的初步筛选还得进一步酶切电泳测序或者目的基因产物测定