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把目的序列插入载体的多酶切位点,这样的话目的序列的前后不是都有克隆位点的残余碱基吗?这样表达出来的

来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/07/17 10:47:09
把目的序列插入载体的多酶切位点,这样的话目的序列的前后不是都有克隆位点的残余碱基吗?这样表达出来的
蛋白不就变了?另外就是有人说引物设计时不用加ATG,载体上有.这个ATG是在MCS位点上吗
把目的序列插入载体的多酶切位点,这样的话目的序列的前后不是都有克隆位点的残余碱基吗?这样表达出来的
一般都会在表达蛋白前面加入序列标签,一般都是组氨酸标签,便于后续的蛋白纯化.但是不要加的太长了,还有就是多出的碱基一定要是3个3个一组的,不能打破了你的蛋白的开放阅读框.多出几个残基对蛋白的影响不会太大,基本可以忽略.这个就要看你的启动子序列之后有没有ATG,如果没有的话就需要加入,有的话就不需要.