ELISA法检测抗原的双抗体夹心法的一些困惑
来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:语文作业 时间:2024/07/18 17:35:05
ELISA法检测抗原的双抗体夹心法的一些困惑
首先,是为什么酶标不能直接标记在一抗上,标记在一抗上之后加底物显色不也可以吗?难道是因为C区已经与固相载体结合?那可以不要固相载体.其次,既然一抗二抗都能与抗原反应,那说明我们对待检抗原的结构也了解了一些吧,为什么不能用电子显微镜直接寻找呢?而且哦,说到底就是抗原抗体反应,干嘛还分直接间接竞争捕获?形式不同罢了,这样不是很难学吗?学了一学期免疫,只能看懂书上的图,但是真的活学活用就不行了.求指导.
首先,是为什么酶标不能直接标记在一抗上,标记在一抗上之后加底物显色不也可以吗?难道是因为C区已经与固相载体结合?那可以不要固相载体.其次,既然一抗二抗都能与抗原反应,那说明我们对待检抗原的结构也了解了一些吧,为什么不能用电子显微镜直接寻找呢?而且哦,说到底就是抗原抗体反应,干嘛还分直接间接竞争捕获?形式不同罢了,这样不是很难学吗?学了一学期免疫,只能看懂书上的图,但是真的活学活用就不行了.求指导.
不直接标记一抗而标记二抗,这是从生产成本上考虑的.二抗大部分是通用的,标记一次可以大量标记,比如10ml或者更多的浓缩液,可以生产上千上万的试剂盒.一次检测就行了
而一抗种类很多,量少,如果标记一抗,比较费事.次次得检测(标记完得检测).HRP标记不是很简单的事
科研用的试剂盒.单品销售量很小的,不值当.
但临床上的ELISA试剂盒是直接标记在一抗上的,他们量大.这样也用着简单.
还有一个,科研试剂盒也不一定用的酶标二抗,有的是生物素放大系统,这样提离灵敏度.
而一抗种类很多,量少,如果标记一抗,比较费事.次次得检测(标记完得检测).HRP标记不是很简单的事
科研用的试剂盒.单品销售量很小的,不值当.
但临床上的ELISA试剂盒是直接标记在一抗上的,他们量大.这样也用着简单.
还有一个,科研试剂盒也不一定用的酶标二抗,有的是生物素放大系统,这样提离灵敏度.
ELISA法检测抗原的双抗体夹心法的一些困惑
我是做ELISA实验的初学者,最近在建立双抗体夹心法的检测方法,不知道如何确定包被浓度和抗原浓度,
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ELISA用双抗体夹心法时,抗体与固相板及酶是怎么结合的?是否固相板与酶是作为抗原与抗体结合的?
为什么双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法?
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