百度作业网免疫组化实验中石蜡切片由于处理过程中会造成抗原交联而影响染色效果,这个“抗原交联”具体是什么意思?
来源：学生作业帮 编辑：百度作业网作业帮 分类：化学作业 时间：2024/07/04 17:39:49
免疫组化实验中石蜡切片由于处理过程中会造成抗原交联而影响染色效果,这个“抗原交联”具体是什么意思?
石蜡切片标本均用甲醛（俗名福尔马林）固定,由于甲醛的聚合作用,使蛋白质分子间相互交联形成大分子网络,也导致了抗原决定簇被掩盖,这就使得相当部分的抗原不能与抗体很好进行反应.这就称为“抗原交联”,也是影响免疫组化染色结果的基本因素.所以在进行IHC染色前,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态.
常用的抗原修复(Antigen retrieval ,AR)技术有微波修复法,高压加热法,酶消化法,水煮加热法,胰蛋白酶、尿素、表面活性剂、微波缓冲液和金属盐等,常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液.通过机械的方法断开因福尔马林固定的导致的抗原表位和不相关蛋白间的交联键,使被掩盖的抗原决定簇或变性的抗原重新暴露或抗原性得到一定程度的恢复,使抗体更好的渗透,与表位结合.
常用的抗原修复(Antigen retrieval ,AR)技术有微波修复法,高压加热法,酶消化法,水煮加热法,胰蛋白酶、尿素、表面活性剂、微波缓冲液和金属盐等,常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液.通过机械的方法断开因福尔马林固定的导致的抗原表位和不相关蛋白间的交联键,使被掩盖的抗原决定簇或变性的抗原重新暴露或抗原性得到一定程度的恢复,使抗体更好的渗透,与表位结合.
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