我现在要做免疫共沉淀检测蛋白质与蛋白质之间的相互作用,我是个新手,从来没做过,我看过一些文献,文献上说的做法大都不太一样

来源：学生作业帮编辑：百度作业网作业帮分类：语文作业时间：2024/07/30 21:46:21

我现在要做免疫共沉淀检测蛋白质与蛋白质之间的相互作用,我是个新手,从来没做过,我看过一些文献,文献上说的做法大都不太一样,我有点糊涂了.我想问一下,是不是先提蛋白,然后做免疫沉淀（加入抗体）做电泳看看蛋白质之间是否有作用就可以了还是需要做更复杂的?请求专业人士解答一下谢谢!

这个过程简单讲就是这么几步：抽蛋白挂抗体到beads上,做成有亲和力的柱子（其实所谓“柱子”就是带有抗体的beads装到Ep管里）抽出来的蛋白去和柱子孵育,抗体识别的蛋白和与此蛋白互做的蛋白就挂到柱子上了洗涤,将抗体不能结合的蛋白洗掉洗脱,可以用蛋白电泳上样缓冲液将beads上的抗体,蛋白,蛋白结合蛋白一起洗下来电泳WB检测之所以叫免疫沉淀,是因为利用了抗体的亲和力,所以叫免疫,而沉淀的意思就是指,抗体挂到beads上,液体里面的物质用固相的beads可以分离出来,所以叫做沉淀.而上面的7个步骤又会根据实际试验的情况发生变化.所以你看到文献上怎么做的人都有.如果感兴趣,我建议你可以先读一些general的protocol,例如：http://www.piercenet.com/files/TR0064-Immunoprecipitation-guide.pdf ,再根据自己的实际状况或者是实验的结果再进行选择.
再问：我看了那个网址，都是英文的啊？有没有中文的啊，我觉得你说的就挺好的，但是就是有点简略，有详细点的吗？我觉得我用应该就可以了
再答：晕倒，我还真没有仔细看过中文的。那个写得有点复杂，而且有好多优化，方法选择的建议，比较全面，对你实验开始以后很有帮助。你现在就是要开始实验，可以看看第10页和11页的内容就行了。别的有需求了，自然就能看进去。
再问：好吧谢谢你！
再问：洗涤用什么
再答：洗涤的话好多可以用啊，如果相互作用比较弱，就用点PBS或TBS就行了，如果是强互做，就加点去污剂，有些就直接用lysis buffer来洗。
再问：恩那我怎么知道作用强弱啊？
再答：可以先用PBS洗，这是比较通用的。做完以后根据实验结果判断。如果发现有很多结合蛋白，也还有杂蛋白，就需要用lysis buffer洗，如果发现什么都洗没了，就说明弱，可能要检测洗涤出来的东西，看看东西丢在哪里了，如果确认就是洗涤的时候丢了，就少洗两次，或者用盐离子浓度比PBS更低的溶液，甚至是水。
再问：我知道了谢谢

我现在要做免疫共沉淀检测蛋白质与蛋白质之间的相互作用,我是个新手,从来没做过,我看过一些文献,文献上说的做法大都不太一样我是新手,从来没做过菜,今天中午家里只有我和我的猫,它不做,只好我来了. 蛋白和RNA的共沉淀要做蛋白A和miRNA的免疫共沉淀,蛋白是上游,可是看到免疫共沉淀都是蛋白与蛋白之间的作用,这个做R 求与植物细胞染色体免疫共沉淀有关的外文与中文文献, 我做的实验,要分离一种儿茶素EGCG和高浓度的尿素,用HPLC检测儿茶素,查到文献上说用乙酸乙酯萃取EGCG,但不知道能我找了工作,老板要我先当一下翻译,主要还是做外贸.我是男的,从来没做过翻译.当翻译要注意什么? 个人月工作总结怎么写我现在是在客车厂做售后工作,但是我从来没写过,不知道这个应该怎么写,有知道的话希望给个全点的具体点资产配置英文文献我要写有关家庭资产配置的论文,必须要有英文文献做参考,不知道有什么英文文献,有点像大海捞针我想要这方面目前汽车起重机伸缩臂滑块是用什么材料制成的?我看过一篇文献说的804塑料, 我是做不锈钢防盗网的,现在也想做铝合金门窗,我没做过! 青椒炒蛋的做法回家了,想吃青椒炒蛋我妈从来没做过呵呵,虽然是很简单的菜英语翻译如题求教~翻译一篇做细胞的文献~没做过细胞~