质粒DNA在基因工程中的作用
来源:学生作业帮 编辑:百度作业网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/08/08 07:38:11
质粒DNA在基因工程中的作用
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在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体.人工构建的质粒可以集多种有用的特征于一体,如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等.常用的人工质粒运载体有pBR322、pSC101.pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr),并含有5种内切酶的单一切点.如果将DNA片段插入EcoRI切点,不会影响两个抗生素基因的表达.但是如果将DNA片段插入到Hind III、Bam H I 或 Sal I切点,就会使抗四环素基因失活.这时,含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素,但对四环素敏感.没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感.pSC101与pBR322相似,只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点.质粒运载体的最大插入片段约为10 kb(kb表示为千碱基对).